1.用窗簾遮蓋光線,關(guān)閉房間內(nèi)的燈光,除去顯微鏡的防塵罩,確保顯微鏡燈室通風(fēng)良好、無遮蓋。裝上汞燈燈箱,并轉(zhuǎn)動(dòng)燈箱卡圈上的撥桿,將燈箱與鏡臂銜接。
2.將汞燈燈箱的電源插頭插入熒光電源箱后的插座,再將熒光電源箱的插頭插入220V外接電源。
3.翻開電源開關(guān),電壓表顯現(xiàn)出電源電壓,如電源電壓動(dòng)搖不大于額定電壓值的±5%,即可按下啟動(dòng)開關(guān)點(diǎn)燃汞燈,如因天氣太冷或電壓不穩(wěn)定等緣由,一次啟動(dòng)未點(diǎn)燃汞燈,能夠多啟動(dòng)幾次。待超高壓汞燈弧光到達(dá)穩(wěn)定狀態(tài)并到達(dá)發(fā)光效率,即可開端工作。
4.燈泡的調(diào)節(jié):
(1)任選一塊標(biāo)本放在載物臺(tái)上;
(2)轉(zhuǎn)動(dòng)鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移出光路,轉(zhuǎn)動(dòng)濾色片組轉(zhuǎn)換手輪,將紫光(V)或藍(lán)光(B)或綠光(G)激起濾色片組轉(zhuǎn)入光路,并將10X熒光物鏡轉(zhuǎn)入光路;
(3)調(diào)理粗微調(diào)手輪,將標(biāo)本像調(diào)焦明晰;
(4)前后推進(jìn)垂直照明器右邊的聚光鏡調(diào)焦推桿,使視場光欄成像明晰,轉(zhuǎn)動(dòng)視場光欄撥桿將視場光欄收小,調(diào)理視場光欄調(diào)中螺釘使視場光欄居中,然后再將視場光欄開至;
(5)轉(zhuǎn)動(dòng)鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移入光路,前后調(diào)理燈箱上的聚光鏡撥桿,使汞燈的弧光在視場內(nèi)成像明晰;
(6)調(diào)整燈箱上的燈泡程度調(diào)理螺釘和垂直調(diào)理螺釘,使汞燈的弧光居中;
(7)調(diào)整反光鏡程度調(diào)理螺釘和垂直調(diào)理螺釘,使光源的反射像與汞燈的弧光分開;
(8)轉(zhuǎn)動(dòng)聚光鏡旋鈕把聚光鏡移出光路,此時(shí)視場照明平均。
5.熒光察看:
(1)將熒光染色標(biāo)本放到載物臺(tái)上。
(2)將10X平場物鏡或40X熒光物鏡轉(zhuǎn)入光路,調(diào)理載物臺(tái)縱橫挪動(dòng)手輪,將標(biāo)本移入光路。
(3)轉(zhuǎn)動(dòng)濾光片轉(zhuǎn)換撥輪,將熒光染色標(biāo)本所需求的激起濾光片組轉(zhuǎn)入光路。激起濾光片組編號(hào)刻在濾片組轉(zhuǎn)換撥輪上。濾光片選擇正確與否,是熒光顯微鏡能否得到正確應(yīng)用的關(guān)鍵。選用濾光片時(shí),必需恪守斯托克斯定律:激起濾光片的透射波長<雙色束別離器的透射波長<阻斷濾光片的透射波長。
由于激起濾光片、雙色束別離器和阻斷濾光片,出廠時(shí)已按其用處和自身的光學(xué)特性停止了嚴(yán)厲的組合匹配,在察看和攝影時(shí),只需選擇濾光片組即可。
(4)調(diào)理粗調(diào)手輪,當(dāng)看清熒光圖像輪廓后,再用微調(diào)手輪調(diào)焦,直至看到明晰的熒光圖像。
(5)當(dāng)需求得到較強(qiáng)的熒光圖像時(shí),可轉(zhuǎn)動(dòng)聚光鏡旋鈕把聚光鏡移入光路,可取得較亮堂的熒光圖像。
(6)當(dāng)需求運(yùn)用40X或100X熒光物鏡察看時(shí),應(yīng)在標(biāo)本和物鏡間加上甘油,油中不能有影響察看的小泡或雜質(zhì)。運(yùn)用時(shí)可使甘油漸漸浸潤一會(huì)兒,然后緩緩左右來回轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器以掃除氣泡。
6.熒光顯微攝影—顯微鏡攝像頭
由于熒光圖像普通均較明場察看暗得多,所以停止熒光顯微攝影需求較長的曝光時(shí)間,在曝光時(shí)應(yīng)留意防止儀器震動(dòng)。
熒光顯微鏡攝影技術(shù)關(guān)于記載熒光圖像非常必要,由于熒光很易褪色削弱,要即時(shí)攝影記載結(jié)果。辦法與普通顯微攝影技術(shù)根本相同。